法国冬青种子种植(小果冬青组培育苗技术)

小果冬青（Ilex micrococca）为冬青科冬青属落叶高大乔木，是华东地区优良的速生用材和观赏树种。其树干通直，高达20米，树姿雄伟，较耐干旱，材质优良，为我国南方重要的家具、农具、造纸用材树种；其树皮经提取可制栲胶，还可作染料；冬季时节小果冬青累累红果艳丽夺目，经久不落，观赏性极强，是近年来园林应用的优良观赏树之一。江苏省林业科学研究院经多年引种观察，发现小果冬青表现优良、生长迅速、观赏价值高，非常适宜丘陵山区景观绿化。

目前，由于小果冬青种子细小、坚硬、发芽率低，人工驯化繁殖存在难度，严重阻碍了小果冬青的有效开发利用。因此，小果冬青组织培养繁育技术可以有效提高小果冬青种苗生产效率，实现小果冬青工厂化育苗，为小果冬青产业开发提供技术支持。

技术要点如下：

1、选材及消毒处理

选择生长健壮且无病虫害的优良单株。从选择的母株上剪取生长健壮的当年生嫩枝作为外植体，嫩枝长度10~15 cm，直径3 mm左右。将外植体放入大烧杯中加少量洗涤剂，然后在流水下冲洗30~60 min，再置于超净工作台上进行常规消毒。宜先使用75 %的乙醇浸泡0.5 min，再用灭菌水冲洗2次；取出后放入无菌三角瓶，用0.1 %的升汞消毒8 min，灭菌水冲洗5次，放在灭菌滤纸上吸去表面水分。

小果冬青

2、诱导培养

将经消毒处理的外植体剪去接触消毒液的伤口部位，切成约1.0 cm 带芽茎段，接种在含有诱导培养基（WPM +0.1 mg·L-1 NAA +0.5 mg·L-1 6-BA+30 g·L-1蔗糖+ 6.3 g·L-1卡拉胶，pH5.8）的培养瓶中，培养温度为（25±2）℃，光照强度为2000 lx ~2500 lx，光照时间为12 h·d-1。培养30 d，长成6~8 cm 高的无菌试管苗。

诱导培养

3、增殖培养

将步骤（2）中长成的试管苗，剪切成长度为1.5~2.0 cm 带有1~2个腋芽的茎段，转接到增殖培养基（WPM+0.5 mg• L-1 NAA+0.2 mg• L-1 6-BA +40 g·L-1蔗糖+ 6.3 g·L-1卡拉胶，pH5.8）中进行增殖培养，光照强度为2000 lx ~2500 lx，光照时间12 h·d-1，温度（25±2）℃，在该培养基中同时可获得健壮的增殖苗，增殖倍数达到4.0倍以上。

增殖培养

4、组培苗瓶外生根

将步骤（3）中株高达6~8 cm且叶片展开的组培苗开瓶培养2 d进行炼苗，取出组培苗，洗净，按单株剪下，每株剪成3~4 cm带芽茎段待扦插；扦插前蘸取生根水（1000 mg/L IBA浸泡5 s），扦插深度以1~1.5 cm，其中扦插的基质选用泥炭。扦插完毕后浇透水，在幼苗上方用保鲜膜覆盖包裹，培养1~2周后撤去保鲜膜，每隔三天浇一次水，每两周喷一次叶面肥，每月喷一次杀菌剂。25~30 d幼苗基部会长出大量根系，2个月后得到健壮的小果冬青苗，并移栽至盆栽容器内进行种植。

瓶外生根