木本花卉其他繁殖法中的组织培养育苗的组织培养的方法及步骤

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木本花卉其他繁殖法中的组织培养育苗的组织培养的方法及步骤

本节，库百科养殖网为您介绍木本花卉其他繁殖法中的组织培养育苗的组织培养的方法及步骤

6.组织培养的方法及步骤：

(1)培养材料的采集：所有植物细胞都具有“全能性”,能够重新形成植株的能力。但表现能力是有差别的，在选择培养材料时，要考虑植株的年龄、生长季节及生理状态。一般说，处于生长季节中的幼嫩材料比较容易培养，所以草本花卉比木本花卉容易培养。接种时，外植体积大，再生能力就强些。用于诱导愈伤组织，外植体的大小则无严格要求，只要把茎、叶、根、花、果或种子切成段、片或块状，接在培养基上即可，一般以0.5厘米为。用茎尖、胚、胚乳等培养时，则需按器官或组织单位切离。

(2)培养材料的消毒：植物体内外都带有各种微生物，一旦与培养基接触，微生物就会很快繁殖，从而影响培养效果。植物材料的灭菌多用化学灭菌法，化学灭菌的种类很多，应选择灭菌效果好，对植物细胞又无伤害作用的方法。常用的灭菌剂的效果，使用以上消毒剂时，要根据材料对药剂的敏感情况，而去选择适当的浓度和处理时间长短，且不可冒然从事。植物材料的消毒方法.先用清水冲洗，除去奉面污物，浸泡在70%酒精中2~3分钟，提出后，立即浸泡于消毒剂溶液中，再捞出，无菌水反复冲洗，以除去材料表面的消毒剂。用无菌滤纸吸千表面水分，可供接种使用。以上操作均在无菌条件下进行。植物不同器官的消毒顺序。

(3)培养材料的制备：经过消毒后的材料，在无苗条件下，用灭过菌的刀、剪、镊等，剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮和种皮胚乳等，叶片不需剥皮，按培养的需要，切成。.2~0.5厘米的小片、小段，作为接种材料。加茎尖培养，还需在双筒解剖镜下进行无菌操作，仔细地剥除其芽鳞及幼叶，露出生长锥，按培养自的，切下所需长短的生长锥进行培养。一般进行去病毒培养，其大小在0.3毫米以下为宜。在操作过程中严禁用手触动材料，以免感染杂菌。

(4)接种和培养：接种是在无菌条件下进行的，目前最佳条件是在超净工作台上接种。材料接种于培养基上时不要过密，以免杂菌感染时互相影响。接种之后，把材料放培养室架上，进行培养，室温保持在26士2℃的恒温条件下。木本花卉接种16~15天，可形成肉眼能看见的愈伤组织，之后转入分化培养基。分化芽和根所需的时间，不同花卉各有差异，一般需要半个月到一个半月，甚至更长时间。在培养过程中，如发现培养基不适宜于愈伤组织的生长和分化，可把愈伤组织切成小块，转移到新的培养基上，或在不同配方比的培养基上进行筛选试验，以找出最佳配方。正常情况下需要20~30天转移培养一次。愈伤组织若先分化发芽，就容易诱导生根。若先生根，再诱导出芽就比较困难。但有些花木先诱导生根，然后根生出芽形成完整的植株，也有根与芽同时分化，形成小苗。当未生根的试管苗长到3~5厘米时，可在无菌条件下，选粗壮苗茎从基部切下，进行芽体转移，接到生根培养基上诱导根的发生，从而形成完整的植株。这一培养过程需要增加光照(1500~200。勒克斯)，一般3周左右生根，并逐步形成完整的根系。其余的无根试管苗仍继代培养，扩大丛状苗，为生根苗打好基础，一般需要20~30天转培一次。

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