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肉牛传染性鼻气管炎的临床症状 肉牛传染性鼻气管炎的防治措施【库百科养殖网】

来源:村晓农业网|更新时间:2020-08-17|点击次数:

肉牛传染性鼻气管炎的临床症状 肉牛传染性鼻气管炎的防治措施

肉牛传染性鼻气管炎也叫做坏死性鼻炎,是由于感染牛传染性鼻气管炎病毒而引发的一种病毒性疾病。肉牛感染病毒后,会呈现潜伏感染或者持续性感染,导致病牛长时间甚至终生携带或者排出病毒,很难彻底控制或者消灭该病,造成较高的死亡率,严重损害养牛业的经济效益,应采取有效的防治措施。下面就一起来看看:肉牛传染性鼻气管炎的临床症状 肉牛传染性鼻气管炎的防治措施。

1、发病特点

在自然感染的条件下,只有牛对该病具有易感性,通常是育肥肉牛容易发生。该病往往呈急性发生,具有传染性,主要导致病牛发热。该病的主要传染源是病牛和带毒牛,尤其是恢复期的病牛能够长时间带毒,对其他健康的易感牛群造成严重威胁。病毒主要经由眼、鼻以及精液、阴道的分泌物排到体外,当易感牛与带毒牛进行交配或者接触的空气飞沫污染有病毒,就会通过生殖道或者呼吸道进行传播,且吸血昆虫也能够作为该病的传播媒介。

2、主要临床症状

呼吸系统感染。一般在冬季比较容易发生,病牛发病初期出现高热,体温升高达到39. 5-42℃,精神非常萎靡,停止采食,出现脓性鼻漏而排出大量黏液,鼻黏膜严重充血,形成浅表性溃疡,发生结膜炎,并大量流泪,鼻镜及鼻窦由于组织严重发炎。病牛往往由于鼻孔被炎性渗出物阻塞而导致呼吸困难,并出现张口呼吸,且由于鼻黏膜发生坏死导致呼出的气体中往往散发臭味。呼吸道黏膜明显发炎,呼吸急促,并伴发深部支气管性咳嗽,存在浅表性溃疡,有黏液脓性渗出物覆盖在上面,并散发腐臭味,包括咽喉、大支气管以及气管,可能发生成片的化脓性肺炎。症状严重的病牛,在数小时内就会发生死亡,大部分病程能够持续超过10天。

眼炎。病牛主要症状是角膜炎、结膜炎,结膜发生水肿、充血,并能够出现灰色的粒状坏死膜;角膜变得略微浑浊,但不会形成溃疡;眼、鼻会流出浆液性分泌物。病牛通常不会表现出明显的全身反应,基本不会发生死亡。

脑膜脑炎。病牛体温明显升高,能够超过40℃,初期精神萎靡,随后过度兴奋,出现惊厥,有白沫从口吐出,最后倒地不起,出现磨牙、角弓反张、四肢划动等症状,病程持续时间较短,主要是犊牛容易发生,具有非常高的死亡率。

生殖道感染。母牛感染病毒后具有1~3天的潜伏期。发病初期,病牛表现出发热,精神萎靡,食欲废绝。频繁排尿,伴有痛感,泌乳量减少,有黏液从阴户流出,并使周围的皮肤被污染,阴门、阴道出现充血、发炎,有一定量黏稠状的黏液性分泌物从阴道流出,但不会散发臭味的。阴门黏膜上存在白色的小病灶,能够形成脓包,且大量的小脓包会导致阴户前庭及阴道壁上覆盖一层灰色坏死膜,将其擦掉或者自行脱落就会出现擦破的发红表皮,接着在急性期消退并开始逐渐愈合,在10-14天后即可恢复。

3、实验室诊断

病原鉴定。对于感染不同类型的病牛,要在相应的部位采集病料,如出现呼吸道型症状,要对处于发热期的病牛用棉拭子采集眼分泌物和鼻液;出现脑膜脑炎型症状,应采集脑组织;出现阴道炎症状,要采集阴道分泌物和外阴部黏膜;出现流产症状,要采集流产胎儿的心血、心包液、胸水以及肺脏等实质器官。采集的病料要马上添加到Hanks液内(其中含有10%犊牛血清,且每毫升还含有500万IU青霉素、500g链霉素),在冷藏条件下及早送到实验室用于分离病毒。一般使用牛胎肾单层细胞培养物进行病毒分离,或者通过荧光抗体法、中和试验来鉴定病毒,或者采取PCR、核酸探针检测、电镜检查等方法对病原进行鉴定。

血清学检测。诊断该病的血清学方法主要包括血清中和试验(SN)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接血凝试验、核酸探针检测技术、琼脂扩散试验以及变态反应检查等。其中El_ISA反应是目前使用比较广泛的一种方法,具有操作简单、特异性好的优点,常在实验室用于检测病毒抗体。

4、防治措施

疫苗免疫。如果牛场已经感染该病,则要对全群牛采取血清病毒中和试验,对于检测结果呈阴性的牛按疫苗规定剂量肌肉注射牛传染性鼻气管炎弱毒苗。如果牛场无法进行血清中和试验,则要给病牛、妊娠后期母牛、临产母牛之外的所有牛都注射牛传染性鼻气管炎疫苗,对于没有注射疫苗的母牛要在分娩后1个月接种牛传染性鼻气管炎疫苗。对于育成牛,通常在配种前或者配种后进行疫苗接种,每6个月进行1次;犊牛在4~5月龄进行疫苗接种,每6个月进行1次。对于接种牛传染性鼻气管炎疫苗的全部牛,要在第1次接种疫苗后经过28天再进行1次疫苗接种。

对症治疗。目前,该病还没有特异性的治疗方式,主要是给病牛采取干扰素疗法或者使用抗病毒药来抑制病毒复制,并使用广谱抗生素来避免出现继发感染,如使用青霉素避免继发引起支气管肺炎。

简介

急性IBRV呼吸道感染还可以继发细菌性肺炎。此病目前在世界范围内流行,对乳牛的产奶量、公牛的繁殖力及役用牛的使役力均有较大影响。20世纪50年代初,以传染性鼻气管炎症状为特征的疾病最先见于美国科罗拉多州的育肥牛群,随后相继出现于洛杉矶和加利福尼亚等地,并命名为牛传染性鼻气管炎(简称IBR)。Madin等于1956年首次从患牛分离到病毒后,一些研究者相继从病牛的结膜(1961)、外阴(1959)、大脑(1962)和流产胎儿(1964)中分离出病毒。Huck于1964年确认牛鼻气管炎病毒属于疱疹病毒。1980年我国从新西兰进口奶牛中首次报道该病,并分离到一株牛传染性鼻气管炎病毒,随后经血清学调查证实,我国广东、广西、河北、河南、上海、山东、四川、甘肃、新疆、黑龙江和青海等省市的黑白花乳牛、本地黄牛、水牛或牦牛均有IBR病毒存在。在一些交通极不便利的地区,IBR病毒抗体阳性率极高。

病原学

牛传染性鼻气管炎(IBR)是由牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)或牛疱疹病毒I型(BHV-Ⅰ)引起,IBRV在分类地位上属疱疹病毒科a疱疹病毒亚科。该病毒呈球形,带囊膜,成熟病毒粒子的直径约150~220 nm,主要由核心、衣壳和囊膜三部分组成。核心由双股DNA与蛋白质缠绕而成,包含基因组的核衣壳为立体对称的正二十面体,外观呈六角形,有162个壳粒,周围为一层含脂质的囊膜。双股DNA分子量为8.4x106,其中G+C含量为72%,浮密度为1.731 g/cm 。 IBRV基因组是138 Kb的线性双股DNA分子,分成特异长区(UL,106 Kb)和短区(US,10 Kb),后者被两个反向重复序列(IRS,TRS各为11 Kb)包围,因而短区能够反转方向,使病毒DNA具有两种异构体。据测IBRV基因组可编码大约70个蛋白质,其结构和功能目前大部分已知,存在于病毒囊膜的gB、gC、gD和gE四个主要精蛋白基因已经测序并在哺乳动物中表达。gB在哺乳动物细胞中的表达显示出引起细胞融合和多核体的形成,对病毒复制是必需的;gC对病毒吸附组织培养细胞是重要的,但它在牛细胞内的表达并不影响病毒蚀斑的数量和病毒的存在;gD被认为是病毒粒子表面和病毒感染细胞的主要分子,抗体糖蛋白的单克隆抗体在病毒吸附后中和病毒并显示出较高的中和滴度,表明gD可能参与病毒进入细胞,并为病毒复制非必需基因。鼠和牛的免疫试验显示出gD能够引起比gB、gC更强和持久的细胞免疫。

诊断

本病的典型病例(上呼吸道炎)具有鼻黏膜充血、脓疱、呼吸困难、鼻腔流脓等特征性症状,结合流行病学,可做出初步诊断,但确诊必须依靠实验室诊断,包括病毒分离鉴定和血清学试验。通常检测血清样品中BHV1抗体的方法有病毒中和试验(VN)和各种酶联免疫吸附试验(ELISA)。另外,还有琼脂扩散试验和间接血凝试验。因为IBRV感染后一般发生病毒潜伏,所以,鉴定血清学中阳性动物是检查动物感染状态非常有用而且理想的指标。抗体阳性动物可认为是病毒携带者和潜在的间歇性排毒者,从初乳获得母源抗体的犊牛和经灭活疫苗免疫的非感染牛除外。

(一)病毒中和试验

中和试验是以测定病毒的感染力为基础的,以比较病毒受免疫血清中和后的残存感染力为依据,判定免疫血清中和病毒的能力。它被认为是血清抗体检测最标准的方法。IBRV只有1个血清型,只要有1个已知标准毒株的免疫血清,通过在敏感细胞培养后所进行的中和试验就可以作出鉴定,但该方法存在费时费力、试验周期长、易受不确定因素影响,如病毒毒价的准确性、细胞量的多少及生长情况、病毒/血清孵育时间长短不同等因素将直接影响中和试验的结果,目前在检疫中逐步被酶联免疫吸附试验(ELISA)所替代。

(二)ELISA

ELISA法是将酶与抗原结合成酶标记物,这些酶标记物仍保持原有的免疫学活性和酶的活性,它可与吸附在固相载体上的抗体发生特异性结合,滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。因此,可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应,颜色反应的深浅与标本中相应抗体量呈正比,此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定。ELISA法因其具有快速、敏感、简便、易于标准化等优点,在大批量动物进口时作为首选方法被推广使用,但经长期应用发现,目前市场上已商品化的ELISA试剂盒或多或少存在有质量问题,出现假阳性或假阴性的几率较大,很难确保检疫质量,而且进口的试剂盒价格普遍偏高,无形中又增加了检疫的成本。

(三)琼脂扩散试验

可用已知的IBR抗原检查被检血清中的沉淀抗体,也可用IBR阳性血清来检测病料标本或细胞培养物中的相应抗原。

(四)间接血凝试验

将已知抗原结合在鞣酸处理的绵羊红细胞上,采用常规的试管凝集法或微量凝集法来检查被检测血清中的相应抗体,这是一种简便、快速、实用的诊断方法。由于IBRV有潜伏感染性,自然感染病牛中和抗体滴度在感染2周时才达到高峰,并且在持续2周或4周后即逐渐下降,且可能降到零,进入潜伏感染期。此后,一旦应激因素刺激,抗体滴度又上升,并排毒,如此反复,IBR感染牛的抗体滴度也随之呈现波浪式的起伏。因此,即便通过中和试验或ELISA法判定牛群IBR抗体呈阴性反应,仍难保证牛群确无IBRV感染。由此可认为,要确定1个牛群是否有IBRV感染的最根本的方法应当是检测IBR抗原。

(五)病毒分离鉴定

1.样品的收集和处理:从早期感染牛采集鼻腔拭子。对于外阴道炎和比较炎病例,采取生殖道拭子,用拭子在生殖道阴道黏膜表面上用力刮取,比较可用生理盐水冲洗包皮,收集其洗液。所有样品均应悬浮于运输培养基(含抗生素和2%犊牛血清的组织培养液),储存于4℃,并迅速送达实验室。样品送到实验室后,将拭子在运输培养基中充分搅动以便将病毒洗脱,室温放置30 min再取出拭子,将运输液1500 r/min离心10 min,取上清液用作病毒分离的样品。用做病毒分离的精液需经特殊处理,因为精液中含有对细胞有毒或对病毒增殖有抑制作用的酶和其它因子。

2.病毒分离:多种细胞可用于IBRV分离,牛胎儿肺、鼻甲或气管等组织制备的细胞株及已建立的传代细胞系(如MDBK细胞)都比较合适。当使用24孔塑料培养板时,每孔需接种细胞培养物上清液100 μl~200 μl,吸附1h后倾去液体,然后,加入维持液。每天观察细胞病变情况,一般于接种后3 d出现细胞病变现象(CPE)。细胞的典型变化是圆缩,聚集成葡萄样群落,在单层细胞上形成空洞,有时会发现有数个细胞核的巨大细胞。若7 d还不出现CPE,应再盲传1次,将培养物经反复冻溶后离心,取其上清液用于接种新的单层细胞做进一步病毒分离。为鉴定致细胞病变的病毒是否为IBRV,细胞培养的上清液必须与单特异IBRV抗血清或单克隆抗体(MAb)作中和试验。

(六)免疫荧光试验

用来检查眼结膜触片、组织切片和细胞培养物涂片中的IBRV。

(七)PCR法

1993年,Vilcek将聚合酶链式反应(PCR)方法用于IBR的诊断。试验证明,PCR比病毒分离更加敏感,阳性检出率比病毒分离高出5倍。甚至可检出3个分子的病毒。由于其具有很高的灵敏度而能够在检测牛血清中微量的IBRV等方面得到重要应用。因此,将PCR技术应用到进出境牛的传染性鼻气管炎病毒的检疫,将会大大降低检疫成本和检疫周期,并有效的提高检出率,为打破贸易技术壁垒、促进我国外贸事业的进一步发展,保护我国畜牧业生产的安全发挥出极大的作用。

临诊症状

自然感染潜伏期一般为4-6天,人工感染(气管内、鼻内、阴道滴注接种)时,潜伏期可缩短至18-72小时,可表现以下临诊类型:

(一)鼻气管炎 最常见的症状,有轻有重。病初高热(40-42℃),精神萎顿,厌食,流泪,流涎,流粘脓性鼻液。母牛乳产量突然下降。鼻粘膜高度充血,呈火红色,并出现浅的、粘膜坏死。呼吸高度困难,呼出气体恶臭,咳嗽不常见。一般经10-14天左右症状消失。

(二)传染性脓疱性阴道炎 病初轻度发热,食欲无影响,产奶量无明显改变。动物表现不安,频尿,排尿时因疼痛而尾部高举。外阴和阴道粘膜充血潮红,有时粘膜上面散在有灰黄色、粟粒大的脓疱,阴道内见有多量的粘脓性分泌物。重症病例,阴道粘膜被覆伪膜,并见有溃疡。孕牛一般不发生流产。病程约2周左右。

(三)传染性龟头包皮炎 龟头、包皮、阴茎等充血,有时可见阴茎弯曲或形成溃疡等。多数病例见有精囊腺变性、坏死。通常在出现病变后一周开始痊愈,彻底痊愈需两周左右。若为种公牛,患病后3-4月间,失去配种能力,但可成为传染源,应及时淘汰。

(四)角膜结膜炎 多与上呼吸道炎症合并发生,病初由于眼睑水肿和眼结膜高度充血,流泪,角膜轻度混浊,一般无溃疡,无明显的全身反应。重症病例,可见眼结膜形成灰黄色针头大颗粒,致使眼睑粘着和眼结膜外翻。眼、鼻流浆性或脓性分泌物。

(五)流产 一般见于初胎青年母牛怀孕期的任何阶段,有时亦见于经产牛。常于怀孕的第5-8个月发生流产,多无前驱症状,约有50%流产牛见有胎衣滞留,流产胎儿不见有特征性肉眼病变。

(六)肠炎 生后2-3周的犊牛感染[1] 不娠妊的原因。

上述症状往往不同程度的同时存在,很少单独发生。

发病机理及病理变化

病毒常常经上呼吸道粘膜、生殖道粘膜侵入,还可经眼结膜上皮和软壳蜱侵入,是否经口腔感染仍未证实。经上呼吸道入侵的病毒沿粘膜、神经纤维、淋巴管扩散到邻近部位引起上呼吸道炎症、结膜炎。虽然血液的细胞成分在病毒复制、扩散中起重要作用,但很少观察到病毒血症。在病毒血症期间,病毒可侵入呼吸道深部、中枢神经系统、胎犊中,在这些部位引起病变,表现发热性全身性呼吸器官疾病、脑膜脑炎或流产。因条件致病菌易在发炎的粘膜中繁殖,所以有时还可能发生继发性炎症病变如肺炎。

呼吸道病变表现在上呼吸道粘膜的炎症,窦内充满渗出物,粘膜上覆有粘脓性、恶臭的渗出物组成的伪膜。在极少数病例,肺小叶间水肿,一般不发生肺炎。组织学检查,粘膜面可见嗜中性粒细胞浸润,粘膜下层有淋巴细胞、巨噬细胞及浆细胞的浸润。在疾病早期,气管上皮细胞内见有Cowdry A型包涵体。

受侵害的消化道表现颊粘膜、唇、齿龈和硬腭溃疡(与粘膜病不同),在食道、前胃、真胃也可见同样的病变,肠表现卡他性炎症。组织学检查,上皮细胞空泡变性,派伊尔结(Peyer’s patches)坏死,肝可见坏死灶、核内包涵体。

生殖道型的病例,表现外阴、阴道、宫颈粘膜、包皮、阴茎粘膜的炎症,一些病例可发生子宫内膜炎。组织学检查,见有坏死灶区积聚大量嗜中性白细胞,坏死灶周围组织有淋巴细胞浸润,并能检出包涵体。

流产胎儿体内所见的肉眼变化,几乎是由于死后所致。组织学检查,在肝、肺、脾、胸腺、淋巴结和肾等脏器常发生弥漫性的灶状坏死。由于胎儿物均系死后排出,因机体自溶,包涵体多已消失,很难检出。

患有脑膜脑炎的病例,除脑膜轻度充血外,眼观上无明显变化。组织学检查可见淋巴细胞性脑膜炎及由单核细胞形成血管套为主的病变。

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