梅花鹿精液的稀释与保存方法_库百科梅花鹿养殖

在养殖梅花鹿过程中，可能因为各种因素而导致母鹿怀不上小鹿，这时候就可能需要人工授精了，下面我们讲讲梅花鹿精液的储存方法以及稀释，一起来看看！

梅花鹿精液的稀释和平衡方法

采精前把稀释液配好或取出加入抗生素，放在35℃恒温箱或水浴锅中，一切玻璃用具都应消毒后放入恒温箱中备用。采精后立即对精液品质进行显微鉴定，精子活力在70%以上、密度中等、每毫升含精子6亿～8亿者方可使用。稀释的具体做法是先用刻度试管或注射器准确量出原精液量，根据要稀释的倍数推算出稀释液的用量。将精液慢慢注入平底烧杯中，再将释释液沿烧杯壁缓缓倒入，可先加一小部分稀释液轻轻摇动烧杯，待其混合均匀后再把稀释液全部倒入。稀释要求在室温下进行，稀释完毕后可将盛有精液的烧杯放在35℃的水中，再取样镜检稀释后的精子活力。一般不应出现精子活力下降现象。最后贴上标记，注明公鹿号，装稀释精液的烧杯外包上棉花，再装入不漏水的塑料袋内，放入冰箱经1.5～2小时缓慢降温至0～5℃，并在此温度下平衡3～5小时。

稀释倍数应根据精子密度和精子活力来确定，需保证每毫升稀释液滴冻10个颗粒，每个颗粒中应含精子数不少于4000万个，其中前进运动的精子数3000万个左右。

梅花鹿精液冷冻保存方法

梅花鹿精液冷冻保存，是把采集的精液经过稀释。装入特殊的容器或制成颗粒，把精液颗粒等放入-196℃的液氮中长期保存，需要用的时候取出解冻使用。这种先进的保存精液的方法便于长途运输和长期保存，可使优良的种鹿发挥更大的配种作用。精液冷冻有安瓶、颗粒、塑料细管三种方法，目前我国主要用颗粒冷冻，这里只介绍颗粒冷冻的操作。

1.冷冻精液稀释液配方

a.12%蔗糖溶液　73.0毫升

卵黄20.0毫升

甘油7.0毫升

b.12%蔗糖溶液76.5毫升

卵黄20.0毫升

甘油3.5毫升

c.12%乳糖溶液73.0毫升

卵黄20.0毫升

甘油7.0毫升

d.12%乳糖溶液78.0毫升

卵黄18.0毫升

甘油4.0毫升

用以上各配方溶液稀释精液时每毫升稀释液加青霉素1000国际单位，链霉素1000微克。

2.室温保存稀释液配方　室温保存精液的理论根据是用酸性环境来抑制精子的活动，以减少其能量消耗，并使之保持在可逆性的“休眠状态”。其配方为：

二水柠檬酸钠2克

无水碳酸氢钠0.2克

葡萄糖0.3克

氨苯磺胺0.3克

蒸馏水100毫升

混合后，加热使之充分溶解，冷却后通入二氧化碳约20分，使p H值达到6.35为止，再加入青霉素1000国际单位/毫升和链霉素1000微克/毫升，然后加入卵黄10%。按1∶40稀释精液，并分装在安瓶中，在室温中保存(18～27℃)。用此种配方的稀释溶液在室温下可保存6～7天。

梅花鹿精液稀释液配制方法

①准确称取糖类、盐类，用双重蒸馏水充分溶解;经过滤后进行高压灭菌，没有高压灭菌器的也可以隔水煮沸15～20分，冷却后放在0～5℃电冰箱中保存备用。

②甘油一般以医药用的较为可靠，使用试剂甘油首先要做安全试验，确定对鹿离体精子无害才能使用。甘油的消毒方法与糖液相同，消毒后放入冰箱1～5℃保存备用。

③卵黄的制取，先把新鲜鸡蛋表面用水清洗，再放入70%酒精溶液中浸泡数小时，如急用时只需要用酒精棉球擦净外壳，破壳后除去蛋清，刺破卵黄膜，使卵黄流入消毒过的量杯中，准确量出所需的量，然后用玻璃棒充分搅拌，使其均匀，放入冰箱备用。

④添加抗生素，抗生素一般在采精前就加入稀释液中。抗生素先用蒸馏水或稀释液溶解，在室温下按量加入。

⑤配制方法，用吸管或量筒准确量取糖溶液(或盐溶液)放入三角量杯中，再吸取甘油滴入上述溶液中，然后加入卵黄，用玻璃棒充分搅动使其均匀。稀释液原则上当天用当天配，也可以在采精前一天配好放入冰箱中备用。

梅花鹿精液冻结和贮存方法

目前精液冻结用的冷源多为液氮。在制精液颗粒时应尽量减少杂质和细菌污染。

a.冻结前的准备

①由于精液颗粒的制做是在外露的环境下进行的，操作室应保持清洁、无灰尘、室内要以紫外线进行消素。操作人员应身着白大衣、戴口罩和帽子。

②使用前检查平衡后的精子活力不能有明显下降。③消毒干燥镊子、胶帽小滴管、漏斗、承受滴冻的漂浮式金属纱网(或铝板)。金属用具可用酒精消毒，玻璃器皿可用蒸煮或干热消毒。④使用的2.9%柠檬酸溶液或生理盐水，液氮或液氮容器均应预先灭菌。

b.结冻将液氮注入结冻用容器内(铝盒、开口液氮容器、广口保温瓶)，容器周围围垫厚泡沫塑料，容器内放一个距液氮液面1～2厘米的漂浮式金属纱网(或铅板、不锈钢板)。滴冻用的铝板或金属纱网需预冷，所以在滴冻前应以液氮浸之，并待其上的液氮挥发掉才能开始滴冻。把平衡后的精液从冰箱中取出，轻轻摇动容器，使上下层的精子分布均匀，使用小滴管吸取精液在网板上滴注，每毫升滴10粒，经1～2分即可结冻，随即收集装入有标记的容器内，塞上灭菌纱布或脱脂棉，立即移入冷冻精液贮存器中贮存。滴冻时为了防止精液温度升高，可将精液容器置于冰瓶中。

c.解冻解冻时要使用解冻液，解冻液又是再次稀释冷冻精液的稀释液。目前常用的解冻液是2.9%柠檬酸钠液和生理盐水。解冻液事先滤过、灭菌，保存在0～5℃的温度下，可以3～4天或1个星期配制1次，如果在室温下保存，最好现用现配。解冻液配制：柠檬酸钠2.9克，加蒸馏水100毫升，过滤煮沸消毒，冷却保存。

解冻温度：解冻一般在40℃水浴中进行。

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