马钱子怎么鉴别真假?中药材马钱子的真假鉴别方法
马钱子的鉴别方法
理化鉴别
1.取胚乳切片,加硫钒酸1滴,显蓝紫色(番木鳖碱反应);另取切片加浓硝酸,显橙红色(马钱子碱反应)。
2.取该品粗粉1 g,加乙醇15 ml,冷浸2小时,滤液蒸干,以1N盐酸溶解,加氢氧化铵碱化,氯仿提取,氯仿液再用1N盐酸提取,酸液中加锌粉及浓盐酸,水浴加热5分钟,冷却后加亚硝酸溶液1滴,即显樱红色 (番木鳖碱反应).
3.薄层层析:⑴ 马钱子碱。⑵ 番木鳖碱。⑶ 马钱子(对照药材)。⑷ 云南马钱(对照药材)。⑸ 马钱子(商品)。⑹ 制马钱。
样 品 液:取粉末0.5 g,加氯仿-乙醇(10∶1)混合液5 ml及浓氨水溶液0.5 ml,振摇5分钟,放置2小时,滤液供试;
对照品液:另取番木鳖碱,马钱子碱加氯仿溶解,制成每1 ml各含2 mg的混合液作对照溶液.
展 开:取10μl分别点样于同一硅胶G板上,用甲苯-丙酮-乙醇-浓氨溶液展开.
显 色:喷稀碘化铋钾试液,对照品显两橙色斑点,马钱子碱在下方,番木鳖碱在上方,供试品显相同的色斑。
含量测定
用高效液相色谱法测定.色谱条件与系统适用性试验:用硅胶为填充剂;正己烷-二氯甲烷一甲醇一浓氨试液(42.5:42.5:5:0.35)为流动相;检测波长为254nm.理论板数按士的宁峰计算应不低于2000.
对照品溶液的制备:精密称取士的宁对照品适量,加醋酸乙酷制成每1ml含0.4mg的溶液,供试品溶液的制备:取该品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加氯仿25ml与浓氨试液1ml,密塞,轻轻振摇,称定重量,放置24小时,再称定重量,用氯仿补足减失的重量,充分振摇,滤过,精密量取滤液10ml,置分液漏斗中,用硫酸溶液(3→100)提取5次,每次15ml,合并硫酸液,加浓氨试液调节pH值至9~10,用氯仿提取5次,每次20ml,合并氯仿液,蒸干,残渣加醋酸乙酯溶解,转移至10ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,即得.
测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各4μl,注人液相色谱仪,测定,即得.该品按干燥品计算,含士的宁(C21H22N2O2)应为1.20%~2.20%.
显微鉴定
种子横切面:种皮表皮细胞分化成单细胞毛,向一侧斜伸,长500~ 1100μm,宽约 25μm以上,其部膨大,似石细胞状,直径约75μm,壁极厚,强木化,有纵长扭曲的纹孔,毛的体部肋状木化增厚,胸腔断面观类圆形;种皮内层为舫的棕色薄壁细胸,内胚乳细胞壁厚约25μm ,胞间连丝隐约可见,以碘液处理后较明显,细胞内含脂肪油滴及糊粉粒。
粉末:灰黄色。
①非腺毛单细胞,大多断裂,完整者长至1100μm,直径25~63μm,壁强木化,基部似石细胞状,壁极厚,纹孔纵裂缝状,毛体部向一方倒伏,圆柱形,顶端钝圆,有 5~18条肋状增厚,易纵裂成裂片,宛如纤维,单个裂片直径3~9μm,有的裂片再 2~ 3不完全纵裂。
②内胚乳细胞多角形、长多角形或类圆形,壁较厚或甚厚,隐约可见极细密的孔沟,有的胞间层呈细波状弯曲,内含脂肪油滴、糊粉粒。此外有色素层(种皮内层细胞)。该品以个大饱满、质坚肉厚、 色灰黄、有光泽者为佳。《中华人民共和国药典》1995 年版规定,该品以干燥品计算,含番木鳖碱应为1.20%~2.20%。
化学鉴定
⑴取胚乳切片,加硫钒酸1滴,显蓝紫色(番木鳖碱反应);另取切片加浓硝酸,显橙红色。(马钱子碱反应)
⑵取马钱子粗粉1g,加乙醇15ml,冷浸2h,滤液蒸干,加1mol/L盐酸溶解,以氧氢化铵试液碱化,氯仿提取,氯仿液再以1mol/L盐酸提取,酸液中加锌粉及浓盐酸,水浴加热5min,冷后加亚硝酸溶液1滴,即显樱红色。(番木鳖碱反应)
(3)薄层层析:取粉末0.5g,加氯仿-乙醇(10:1)混合液5ml及浓氨水溶液0.5ml,振摇5min,放置2h,滤液供试,另取番木鳖碱、马钱子碱加氯仿溶解,制成每1ml各含2mg的混合液作对照。各取10μl分别点样于同一硅胶G板上,以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨溶液(40:50:6:4) 展开15cm,取出晾干,喷以稀碘化铋试液,对照品显两橙色斑点,马钱子碱在下方,番木鳖碱在上方,供试品显相同的色斑。
【附注】:同属植物云南马钱S.pierriana A.W.Hill.的种子亦作马钱子入药。
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